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保護柱一般帶填料,相當于一根縮短了的色譜柱(一般是1-2cm長度),卡套里可更換的柱芯,柱管、篩板和填料都有。保護柱里的柱芯好像是在前面開路的掃雷隊,流動相和樣品里如有什么損害柱子的污染物,保護柱就自己承受了下來。
而預柱,現在一般指的就是接在進樣器和色譜柱之前的在線過濾器。在線過濾器和保護柱的大區別是不帶填料,只有可更換的篩板。預柱只能保護其免受顆粒物質的污染,而不能阻擋溶解在流動相中的強保留物質。
保留時間是液相色譜中一個很有用的診斷分離問題的工具。保留時間受流動相組成、溫度、pH、流速、固定相流失和柱老化等很多因素的影響,如果所有這些參數保持不變,保留時間也保持恒定。但在實際操作中,不可能對每個色譜參數進行很完美的控制,如即便加了柱溫箱,溫度還是會有波動;流動相組成會因組分揮發性不同而改變。
所以保留時間有上下0.02-0.05min的變動是非常正常的,對某些方法有0.1min上下變動也屬正常。保留時間有大的變化,預示著系統和方法存在問題。流路里有氣泡存在,泵閥有泄漏,會因流量降低而導致保留時間增加。梯度混合比例閥故障也是保留時間變化原因之一。
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